Mis on esmase antikeha eesmärk Western blot meetodil?
Mis on esmase antikeha eesmärk Western blot meetodil?

Video: Mis on esmase antikeha eesmärk Western blot meetodil?

Video: Mis on esmase antikeha eesmärk Western blot meetodil?
Video: Jess Training: Your Protein Analysis Solution For Automated Western Blots 2024, Juuli
Anonim

Otsese tuvastamise meetodiga konjugeeritakse ensüümi või fluorofooriga primaarne antikeha kasutatakse huvipakkuva antigeeni tuvastamiseks blot . Kaudse tuvastamise meetodi puhul märgistamata primaarne antikeha kasutatakse esmalt antigeeniga seondumiseks.

Lisaks, mis on esmane antikeha Western blot'is?

The primaarne antikeha tunneb ära ja seob huvipakkuva valgu epitoopi või spetsiifilise aminohappejärjestuse. Sekundaarne antikehad kasutatud western blotting on tavaliselt konjugeeritud ensüümiga; kõige sagedamini kasutatavad ensüümid on mädarõika peroksidaas (HRP) ja leeliseline fosfataas (AP).

Lisaks, mida esmane antikeha teeb? Primaarsed antikehad on immunoglobuliinid, mis seonduvad spetsiifilise antigeeniga ( valk , peptiid, väike molekul jne) ja on tavaliselt konjugeerimata. Hea primaarne antikeha tunneb ära ja seob suure afiinsusega ja spetsiifiliselt antigeeni puhastamiseks, tuvastamiseks ja mõõtmiseks.

Järelikult, mis on Western blot'i eesmärk?

A western blot on laborimeetod, mida kasutatakse valkude segust spetsiifiliste valgumolekulide tuvastamiseks. Seejärel eraldatakse valgumolekulid vastavalt nende suurusele, kasutades meetodit, mida nimetatakse geelelektroforeesiks. Pärast eraldamist kantakse valgud geelilt a -le määrimine membraan.

Kuidas kasutatakse antikehi Western blot meetodil?

Antikehad on kasutatud sihtmärkvalkude tuvastamiseks western blot (immunoblot). The antikehad on konjugeeritud fluorestseeruvate või radioaktiivsete etikettide või ensüümidega, mis annavad rakendatud reaktiiviga järgneva reaktsiooni, mille tulemuseks on värvimine või valguse kiirgus, võimaldades tuvastamist.

Soovitan: